BD CHROMagar Orientation Medium

Transcription

1 INSTRUCŢIUNI DE UTILIZARE MEDII PE PLĂCI PREGĂTITE PENTRU UTILIZARE PA Rev.: Sep 2011 BD CHROMagar Orientation Medium UTILIZARE SPECIFICĂ BD CHROMagar Orientation Medium este un mediu neselectiv pentru izolarea, identificarea directă, diferenţierea şi enumerarea patogenilor tractului urinar. BD CHROMagar Orientation Medium permite diferenţierea şi identificarea Escherichia coli şi Enterococcus fără teste de confirmare. PRINCIPII ŞI EXPLICAREA PROCEDURII Metodă microbiologică. Escherichia coli, enterococii, grupurile Klebsiella-Enterobacter-Serratia şi Proteus-Morganella- Providencia sunt organismele care produc cel mai frecvent infecţii ale tractului urinar (=ITU). Şaizeci până la 70% dintre ITU sunt produse de către E. coli în cultură pură sau împreună cu enterococi. Staphylococcus saprophyticus şi Streptococcus agalactiae sunt, deşi mai puţin frecvent, întâlniţi în ITU la femei. Datorită sensibilităţii diferite la antimicrobiene, pentru identificarea speciilor de agenţi patogeni implicaţi este necesară efectuarea unor baterii de teste biochimice în vederea stabilirii terapiei antimicrobiene eficiente. Aceasta este una dintre sarcinile care consumă cel mai mult timp întrun laborator în care sunt prelucrate probele de urină. Speciile sau grupurile de organisme care sunt cel mai frecvent izolate produc enzime caracteristice. Astfel, este posibilă identificarea acestor organisme la nivel de specie cu un număr limitat de teste de utilizare sau de fermentare a substratului. 1,2 Unele dintre organismele implicate produc enzime pentru metabolizarea lactozei, pentru metabolizarea glicozidelor sau pentru ambele, în timp ce altele nu produc niciuna dintre aceste enzime. De exemplu, E. coli produce enzime pentru metabolismul lactozei, dar este ß- glicozidază negativă. Alţi membri ai familiei Enterobacteriaceae sunt ß-glicozidază pozitivi, dar nu conţin enzimele necesare fermentaţiei lactozei sau alţii conţin ambele tipuri de enzime sau niciuna dintre ele. Beta-glicozidazele se găsesc, de asemenea, în cocii Gram pozitivi cum sunt speciile de Enterococcus şi Streptococcus agalactiae. Triptofan deaminaza (TDA) este o enzimă caracteristică pentru grupul de organisme Proteus-Morganella-Providencia. Evaluările de performanţă au demonstrat că BD CHROMagar Orientation Medium este superior mediilor utilizate în mod curent pentru izolarea, diferenţierea şi numărarea patogenilor ITU, cum ar fi agarul CLED sau combinaţia de agar-sânge şi agar MacConkey. 3-5 BD CHROMagar Orientation Medium permite identificarea E. coli direct pe placa de izolare; în plus, identificarea prezumptivă a majorităţii tulpinilor de Staphylococcus saprophyticus şi S. agalactiae, precum şi a grupurilor Klebsiella-Enterobacter-Serratia (=KES) şi Proteus- Morganella-Providencia (=PMP) este posibilă prin intermediul mijloacelor de colorare a coloniilor sau a mediului. Deoarece BD CHROMagar Orientation Medium nu este selectiv, pot creşte alţi patogeni ITU, astfel încât pentru identificare sunt necesare teste biochimice. Mediul de orientare CHROMagar a fost dezvoltat de către A. Rambach şi este comercializat de către BD sub licenţă CHROMagar, Paris, Franţa. În BD CHROMagar Orientation Medium substanţele nutritive necesare sunt furnizate de către peptone selectate special. Amestecul cromogen constă în substraturi artificiale (cromogeni) care eliberează compuşi coloraţi diferit la degradarea de către ezime microbiene specifice, asigurând astfel diferenţierea directă a anumitor specii sau depistarea anumitor grupuri de organisme cu un minim de teste de confirmare. PA Page 1 of 7

2 REACTIVI BD CHROMagar Orientation Medium Formula* pentru un litru de apă purificată Cromopeptonă 16,1 g Amestec cromogen 1,3 Agar 15,0 ph 6,9+/-0,2 *Ajustată şi/sau suplimentată după cum este necesar pentru a îndeplini criteriile de performanţă. PRECAUŢII. Numai pentru uz profesional. Nu utilizaţi plăcile dacă prezintă semne de contaminare microbiană, decolorare, deshidratare, fisuri sau alte semne de deteriorare. Consultaţi documentul INSTRUCŢIUNI GENERALE DE UTILIZARE pentru detalii referitoare la procedurile de manipulare aseptică, riscurile biologice şi înlăturarea produselor utilizate. DEPOZITAREA ŞI DURATA DE DEPOZITARE La recepţie, depozitaţi plăcile la întuneric la 2 până la 8 C, în ambalajul original până în momentul utilizării. Evitaţi congelarea sau supraîncălzirea. Plăcile pot fi inoculate până la expirarea termenului de valabilitate (consultaţi eticheta ambalajului) şi pot fi incubate pentru perioadele recomandate de incubare. Plăcile dintr-un teanc de 10 plăci desfăcut pot fi utilizate timp de o săptămână dacă sunt depozitate într-o zonă curată între 2 şi 8 C. Controlul calităţii efectuat de utilizator Inoculaţi probe relevante cu următoarele tulpini (pentru detalii consultaţi documentul INSTRUCŢIUNI GENERALE DE UTILIZARE). Incubaţi plăcile într-o poziţie răsturnată la 35 până la 37 C, în atmosferă aerobă, timp de 20 până la 24 de ore. Tulpini Escherichia coli ATCC Enterobacter cloacae ATCC Proteus mirabilis ATCC Enterococcus faecalis ATCC Streptococcus agalactiae ATCC Staphylococcus aureus ATCC Staphylococcus saprophyticus ATCC (=NCTC 10516) Neinoculate Rezultatele creşterii Creştere bună, până la excelentă; colonii de dimensiuni medii, până la mari, trandafiriu închis până la roz, transparente Creştere bună, până la excelentă; colonii de dimensiuni medii, albastru intens, cu sau fără halou violet Creştere bună, până la excelentă; colonii de dimensiuni medii, de culoare pală până la bej, înconjurate de un halou chihlimbariu până la maro; în zonele de creştere densă, tot mediul poate fi chihlimbariu până la maro. Procesul de invazie este inhibat parţial sau complet. Creştere bună până la excelentă; colonii mici, albastre-verzui până la albastre Creştere moderată până la bună; colonii punctiforme până la mici, albastru-verde deschis până la albastru deschis, cu sau fără halou Creştere bună până la excelentă; colonii de dimensiuni medii până la mici, de culoare naturală (albe, până la crme) Creştere acceptabilă până la bună; colonii mici, opace, roz deschis până la trandafirii Incoloră până la chihlimbarie, transparentă PROCEDURĂ Materiale furnizate BD CHROMagar Orientation Medium (plăci Stacker de 90 mm). Controlate microbiologic. PA Page 2 of 7

3 Materiale nefurnizate Medii de cultură auxiliare, reactivi şi echipamentul de laborator necesar. Tipuri de probe Acest mediu este utilizat exclusiv pentru enumerarea şi diferenţierea bacteriilor din urină. Poate fi utilizată urina obţinută de la mijlocul jetului, prin cateterizare sau prin puncţie suprapubiană (consultaţi şi CARACTERISTICI DE PERFORMANŢĂ ŞI LIMITĂRILE PROCEDURII). Respectaţi tehnicile aseptice de colectare a probelor de urină. Trebuie efectuate striaţii cu urină direct pe mediu (nu mai târziu de 2 ore de la colectare) sau urina trebuie păstrată refrigerată (nu mai mult de 24 de ore) pentru a evita creşterea şi dezvoltarea agenţilor infecţioşi şi a contaminanţilor înainte de inocularea pe acest mediu. Procedură de testare Utilizarea anselor calibrate sau a altor tehnici utilizate în mod uzual la inocularea pe plăci a probelor de urină este obligatorie pentru obţinerea unor colonii izolate, cu formele şi culorile tipice. Recoltaţi un eşantion de urină nediluată, bine amestecată, utilizând o ansă calibrată (0,01 sau 0,001 ml). Asiguraţi-vă de încărcarea corespunzătoare a ansei cu probă. Inoculaţi eşantionul printr-o singură trăsătură prin centrul plăcii, din care vor fi efectuate dispersări suplimentare ale inoculului. 6,7 Incubaţi plăcile în poziţie răsturnată la temperaturi între 35 şi 37 C în atmosferă aerobă, timp de 20 până la 24 de ore. Evitaţi expunerea la lumină pe parcursul incubaţiei întrucât aceasta poate distruge cromogenii. Expunerea la lumină este permisă după apariţia culorilor coloniilor. Rezultate După incubaţie, plăcile trebuie să prezinte colonii izolate în zonele în care inoculul a fost diluat corespunzător. Pentru identificare sau diferenţiere trebuie utilizate tabelul 1 şi schema 1, care servesc drept îndreptar în vederea efectuării unor teste suplimentare de confirmare. Pentru confirmarea rezultatelor pot fi utilizate microscopia şi coloraţiile Gram. Teste de confirmare Efectuaţi testele de confirmare în funcţie de necesităţi (Tabelul 1, Schema 1). Nu aplicaţi reactiv de detecţie direct pe coloniile de pe BD CHROMagar Orientation Medium. Prelevaţi eşantioane din coloniile respective şi efectuaţi testele pe hârtie de filtru. Pentru coloniile de E. coli care sunt trandafirii închis până la roz, dar punctiforme, până la mici în dimensiuni, nu utilizaţi reactivul Kovacs cu indol, deoarece culoarea lor roşie poate interfera cu roşul de pozitivitate al testului pentru indol; utilizaţi, în schimb, reactivul cu indol, dimetilamino-cinam aldehidă (DMACA) (verde = pozitiv). Dacă sunt utilizate alte teste de confirmare sau sisteme de identificare biochimică, trebuie urmate instrucţiunile care însoţesc aceste teste sau sisteme. Efectuaţi teste de confirmare pentru Enterococcus numai dacă este necesară identificarea speciei, dincolo de nivelul genului. PA Page 3 of 7

4 Tabelul 1 Indicaţii pentru identificare bazată pe diferenţa de culoare a coloniilor Organism Aspect pe BD CHROMagar Orientation Medium E. coli a Colonii de dimensiunii medii către mari, trandafirii închis către roz, transparente, cu sau fără halou în mediul din jur Grupul KES b Colonii de dimensiuni medii, albastre către albastru închis, cu sau fără halou violet Grupul PMP c Colonii de culoare pală către bej, înconjurate de halou maro d Enterococcus Colonii mici, albastre-verzi S. agalactiae Colonii albastre-verzi deschis către alabstru, punctiforme până la mici, cu sau fără halou S. saprophyticus Colonii opace mici, roz deschis (majoritatea tulpinilor) până la trandafiriu, cu sau fără Teste de confirmare (Necesare pentru diferenţiere suplimentară) BBL CRYSTAL E/NF pentru diferenţieri în cadrul genului Indol, H 2 S e, ODC f, BBL CRYSTAL E/NF pentru diferenţiere în cadrul genului PYR g disc de novobiocin 5 µg h halou Altele (inclusiv levuri) Pigmentare naturală (crem) Teste adecvate de identificare biochimică şi serologică Pentru notele de subsol a-h, consultaţi Schema 1 Schema 1: Instrucţiuni pentru efectuarea testelor de identificare asupra organismelor selectate Aspectul coloniilor Mici, trandafirii, opace Colonii de la incolore la bej, mediu portocaliu-maro disc de novobiocin 5 µg Grupul PMP sensibil rezistent Testul DMACA i cu indol S. intermedius S. simulans BBL CRYSTAL GP pentru S. sapro- diferenţiere în cadrul phyticus, S. xylosus genului verde (pozitiv) H 2 S pozitiv e H 2 S negativ e incolor până la trandafiriu (negativ ODC pozitiv f ODC negativ f P. vulgaris specii de Providencia, specii de Morganella. P. mirabilis P. penneri a Consultaţi Limitările procedurii b KES = grupul Klebsiella-Enterobacter-Serratia c PMP = grupul Proteus-Morganella-Providencia d Culoarea chihlimbarie până la maro se datorează reacţiei pozitive la triptofan deaminază (TDA) comună tuturor organismelor din grupul PMP. Până la 50% din tulpinile P. vulgaris produc colonii albastre pe mediu chihlimbariu până la maro. e Testul convenţional al hidrogenului sulfurat. f Testul convenţional al ornitin decarboxilazei. g Testul piroglutamatului pentru pirolidonil arilamidază. h Inoculaţi izolatul prin dispersare pe o placă cu agar Mueller Hinton II. Amplasaţi novobiocin (disc de 5 µg) pe placa inoculată. Incubaţi 18 până la 24 de ore la 35 până la 37 C şi determinaţi dimensiunea zonei de inhibiţie. (rezistent: 16 mm, sensibil: > 16 mm). i DMACA= reactivul dimetil-amino-cinam aldehidă pentru producerea de indol. Aplicaţi reactivul pe hârtia de filtru şi frecaţi o colonie pe zona de pe hârtia de filtru care conţine reactiv. Aşteptaţi sec. Apariţia culorii verde indică producerea de indol (roşu sau incolor = negativ). PA Page 4 of 7

5 Calcularea şi interpretarea rezultatelor 6,7 Număraţi coloniile (ufc) de pe placă. Dacă a fost utilizată o ansă de 0,01 ml, fiecare colonie rezultată reprezintă 100 UFC/ml; dacă a fost utilizată o ansă de 0,001 ml, fiecare colonie corespunde la 1000 UFC/ml de urină. 7 Urina obţinută din mijlocul jetului şi cu ajutorul cateterului: Actualmente se consideră că pentru un singur izolat, o densitate 10 5 ufc/ml indică infecţie, <10 5 ufc/ml indică contaminare uretrală sau vaginală, iar între 10 4 şi 10 5 UFC/ml este necesară reevaluarea pe baza informaţiilor clinice. 7 Bacteriile de contaminare apar de obicei în număr mic, iar coloniile prezintă morfologii variate. Urina recoltată prin puncţie vezicală suprapubiană: Deoarece vezica este sterilă la subiecţii fără infecţie, depistarea oricărui indice ufc indică o infecţie. Patogenii tractului urinar apar de obicei în număr mare, prezentând pe acest mediu colonii cu morfologie şi culoare uniforme. CARACTERISTICILE DE PERFORMANŢĂ ŞI LIMITĂRILE PROCEDURII BD CHROMagar Orientation Medium este un mediu cromogen pentru identificarea, diferenţierea şi enumerarea în mod direct a patogenilor uzuali ai tractului urinar. Mediul este adecvat pentru izolarea multor microorganisme aerobe, cum ar fi Enterobacteriaceae, Pseudomonas şi alţi bacili Gram negativi nefermentativi, enterococi, stafilococi precum şi numeroase alte microorganisme din probele de urină. Evaluările de performanţă ale BD CHROMagar Orientation Medium au arătat că acesta prezintă avantaje faţă de alte medii diferenţiale, utilizate la izolarea, diferenţierea şi enumerarea patogenilor ITU, cum ar fi agarul CLED sau combinaţiile agar-sânge cu agar MacConkey. 3-5 BD CHROMagar Orientation Medium permite diferenţierea şi identificarea E. coli şi a enterococilor fără teste de confirmare, pe baza criteriilor de identificare stabilite de către standardul M35-A al CLSI, Abbreviated Identification of Bacteria and Yeast; Approved Guideline. 8 Identificarea prezumtivă a S. saprophyticus, S. agalactiae şi agrupurilor Klebsiella- Enterobacter-Serratia (KES) şi Proteus-Morganella-Providencia (PMP), este posibilă prin evaluarea morfologiei coloniilor, a colorării sau a decolorării mediului. Deoarece majoritatea infecţiilor comune ale tractului urinar sunt produse de E. coli şi/sau enterococi, utilizarea acestui mediu reduce în mod semnificativ cantitatea de lucru şi timpul necesar inoculării şi interpretării sistemelor de identificare necesare atunci când sunt utilizate mediile convenţionale. Rezultate de performanţă 4,9,10 Performanţele microbiologice ale BD CHROMagar Orientation Medium şi ale unui mediu cromogen concurent au fost comparate cu cele ale agarului Columbia cu 5% sânge de oaie şi ale agarului MacConkey fără cristal violet, pentru enumerarea şi identificarea prezumtivă a bacteriilor răspunzătoare de infecţiile tractului urinar. 4 Din totalul celor 658 de probe clinice de urină, 118 probe nu au produs creştere, 402 au produs creştere cu număr de celule 10 5 UFC/ml, şi 138 au produs creştere cu număr de celule <10 5 UFC/ml. Dintre probele cu număr de celule 10 5 UFC/ml, 163 au fost culturi pure şi 239 au fost culturi mixte. Au fost obţinute 266 de izolate de Escherichia coli din ambele medii cromogene, 260 au fost izolate pe agar-sânge, şi 248 au fost izolate pe agar MacConkey. O singură tulpină (0,4%) nu a dezvoltat culoarea roz aşteptată pe BD CHROMagar Orientation Medium, iar 23 de tulpini (8,7%) nu au dezvoltat culoarea roz pe mediul concurent. Enterococii (BD CHROMagar Orientation Medium, n = 266; mediul concurent, n = 265) au produs pe ambele medii cromogene mici colonii albastre-verzi. Cincizeci dintre culturile mixte care conţineau enterococi au fost detectate pe mediile cromogene. Grupurile Klebsiella-Enterobacter-Serratia (KES) şi Proteus-Morganella-Providencia (PMP) au fost identificate pe ambele medii cromogene. Dintre cele 66 de izolate ale grupului KES, 63 au crescut pe BD CHROMagar Orientation Medium şi au prezentat culoarea estimată şi 58 din 64 de izolate au crescut pe mediul concurent. Alte microorganisme au necesitat teste de identificare ulterioare. În a doua evaluare a performanţei au fost utilizate 421 de probe clinice de urină, dintre care 286 au susţinut creşterea bacteriilor sau a levurilor; BD CHROMagar Orientation Medium a fost PA Page 5 of 7

6 comparat cu BD Columbia Agar with 5% Sheep Blood. 9 Pe mediul cromogen au fost obţinute 483 de izolate, iar pe mediul agar-sânge au fost izolate 447 de tulpini. Tulpinile au fost identificate biochimic. Dintre tulpinile de E. coli, 95% au fost identificate corect datorită culorii trandafirii până la roz a coloniilor, în timp ce restul tulpinilor de E. coli au fost nepigmentate. Toate izolatele de specii de Enterococcus au prezentat culoarea caracteristică de albastru, până la albastru-verzui a coloniilor. Izolatele de Streptococcus agalactiae au produs colonii mici albastru deschis până la albastru verzui care au fost diferenţiate de enterococi cu testul PYR, negativ. Toate izolatele de Staphylococcus saprophyticus şi S. simulans au produs colonii mici, opace, roz şi au fost diferenţiate cu testul novobiocin şi identificate la nivel de specie cu teste biochimice. Într-un studiu orb intern care a inclus testarea a peste 900 de tulpini bacteriene însămânţate în urină, sensibilitatea şi specificitatea mediului BD CHROMagar Orientation Medium pentru identificarea E. coli, numai pe baza morfologiei şi culorii coloniilor, au fost de 97% şi respectiv de 99%; pentru Enterococcus sensibilitatea şi specificitatea la identificare au fost de 99% şi respectiv 97%, (consultaţi tabelul). 10 Organism Sensibilitate % (interval de fiabilitate de 95%) E. coli 277/286 96,9% (94,1-98,6%) Enterococcus 319/324 98,5% (96,4-99,5%) Specificitate % (interval de fiabilitate de 95%) 638/645 98,9% (97,8-99,6%) 603/622 97% (95,3-98,2%) Limitările procedurii Deoarece acesta este un mediu neselectiv, vor creşte şi alţi patogeni ai ITU. Coloniile care prezintă culoarea naturală şi nu reacţionează cu substratul cromogen de la nivelul BD CHROMagar Orientation Medium trebuie diferenţiate cu ajutorul testelor biochmice şi serologice. Consultaţi bibliografia. 1,2 Coloniile de E. coli care sunt trandafirii închis până la roz dar au dimensiuni de la punctiforme la mici, necesită teste de confirmare, cum ar fi testul indolului (reactivul DMACA cu indol). Bacilii Gram negativi care aparţin grupului KES pot produce colonii albastre mari pe BD CHROMagar Orientation Medium necesitând astfel teste biochimice suplimentare pentru identificarea lor. 11 În cazuri foarte rare, pot fi prezente în urină Listeria monocytogenes sau alte specii de Listeria (de ex., după avortul cauzat de aceşti agenţi). Listeria produce colonii mici albastre, până la albastre-verzi care sunt PYR-negative, mimând Streptococcus agalactiae. În consecinţă, poate fi utilă prepararea de coloraţii Gram pentru toate tulpinile care produc colonii minuscule până la mici, albastre până la albastre-verzi şi care sunt PYR negative. Prezenţa bastonaşelor Gram pozitive poate indica specii Listeria, dar sunt necesare teste biochimice suplimentare pentru a confirma identificarea. Foarte rar, izolatele de Aeromonas hydrophila pot produce colonii trandafirii până la roz. Pot fi diferenţiate de E. coli cu un test de oxidază (Aeromonas = pozitiv; E. coli = negativ). În mod ocazional, stafilococii coagulazo-negativi, alţii decât S. saprophyticus, de ex., S. simulans, S. xylosus, şi S. intermedius, produc colonii mici, trandafirii, opace. În consecinţă, este necesară efectuarea unor teste suplimentare pentru aceste izolate (consultaţi Schema 1). BD CHROMagar Orientation Medium nu susţine creşterea unor organisme pretenţioase cum ar fi Neisseria, Haemophilus sau specii de Mycoplasma. Nu a fost documentată utilizarea acestui mediu pentru alte probe clinice sau ne-clinice în afară de urină. PA Page 6 of 7

7 Înainte de a utiliza pentru prima dată BD CHROMagar Orientation Medium, este recomandată exersarea privind aspectul coloniilor pentru tulpinile definite, de ex., tulpinile menţionate în CONTROLUL CALITĂŢII EFECTUAT DE UTILIZATOR. REFERINŢE 1. Isenberg, H.D. (ed.) Clinical Microbiology Procedures Handbook, vol. 1. American Society for Microbiology. Washington, DC. 2. Forbes, B.A., D.F. Sahm, and A.S. Weissfeld Bailey & Scott s diagnostic microbiology, 10th ed. Mosby, Inc., St. Louis. 3. Merlino, J., S. Siarakas, G. J. Robertson, G. R. Funnell, T. Gottlieb, and R. Bradbury Evaluation of CHROMagar Orientation for differentiation and presumptive identification of gram-negative bacilli and Enterococcus species. J. Clin. Microbiol. 34: Hengstler, K.A., R. Hammann, and A.-M. Fahr Evaluation of BBL CHROMagar Orientation medium for detection and presumptive identification of urinary tract pathogens. J. Clin. Microbiol. 35: Samra, Z., M. Heifetz, J. Talmor, E. Bain, and J. Bahar Evaluation of use of a new chromogenic agar in detection of urinary tract pathogens. J. Clin. Microbiol. 36: Clarridge, J.E., M.T. Pezzlo, and K.L. Vosti Cumitech 2A, Laboratory diagnosis of urinary tract infections. Coordinating ed., A.S. Weissfeld. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 7. Forbes, B.A., and P.A. Granato. Processing specimens for bacteria In: Murray, P. R., E. J. Baron, M. A. Pfaller, F. C. Tenover, and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 6th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 8. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI, formerly NCCLS). Approved Guideline M35. Abbreviated identification of bacteria and yeast, CLSI, Wayne, PA.Search for latest version at 9. Datele din fişier. BD Diagnostic Systems Europe, Heidelberg, Germany. 10. Datele din fişier. BD Diagnostic Systems, Sparks, MD, S.U.A. 11. Abbott, S.L Klebsiella, Enterobacter, Citrobacter, Serratia, Plesiomonas, and other Enterobacteriaceae. In: Murray, P. R., E. J. Baron, J.H. Jorgensen, M. A. Pfaller, and R. H. Yolken (ed.). Manual of clinical microbiology, 8th ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. AMBALAJ/DISPONIBILITATE BD CHROMagar Orientation Medium Nr. cat Medii pe plăci pregătite pentru utilizare, cpu 20 Nr. cat Medii pe plăci pregătite pentru utilizare, cpu 120 INFORMAŢII SUPLIMENTARE Pentru informaţii suplimentare, contactaţi reprezentantul local BD. Becton Dickinson GmbH Tullastrasse 8 12 D Heidelberg/Germany Phone: Fax: Reception_Germany@europe.bd.com CHROMagar is a trademark of Dr. A. Rambach. ATCC is a trademark of the American Type Culture Collection BD, BD Logo and all other trademarks are property of Becton, Dickinson and Company BD PA Page 7 of 7